

魚體肝臟勻漿做一些指標的取樣濃度?
發布時間:2014/2/8 9:00:59 瀏覽次數:6151 [字號:大 中 小] [關閉此頁 打印此頁]
之前我們用貴所的蛋白質,總SOD、CAT、MDA、試劑盒測定過程當中都有一個最佳取樣量摸索的問題,現在我們試圖增加新指標,分別是羥自由基,GSH、GSH-PX、GSH-ST、GR的試劑盒,在閱讀完說明書我們發現其中有幾樣指標并沒有給出最佳取樣量的說明,有羥自由基,GR、GSH-ST、GSH。因為我們做的是魚體肝臟勻漿,并不是通常測定的小鼠肝臟勻漿,在勻漿濃度上我們可能還需要更多的參考,請問有什么意見可以給我在各個指標測定中勻漿濃度有更多的參考依據。
另外樣品測定過程中不可避免的會遇到樣品保存的問題,勻漿完保存樣品在測定上會不會有較大的影響呢,因為樣本是魚體肝臟,不像老鼠肝臟會比較大塊,我們不能保存肝臟樣,會將其勻漿后保存
另外在自由基測定上,試劑二應用液配制針對抑制和產生自由基有不同的配法,我對備注中給出的對組織樣品會抑制自由基有點疑惑,是否可以麻煩解答。
回復:
1、從肝勻漿的測定記錄來看,GR、GSH、GSH-ST一般都是直接用10%勻漿進行測定。但是羥自由基試劑盒,都需要做預實驗(隨貨說明書上有附錄,專門關于預實驗的操作詳細流程)
2、關于樣本的保存,一般我們都是建議直接保存組織,一旦制備勻漿以后相關指標的穩定性都不好!像老師的指標,羥自由基、GR最好是要當天完成,GSH-ST和GSH可以第二天完成(4℃密封保存)
3、羥自由基測定,我們試劑盒主要檢測的是抑制羥自由基的能力和產生羥自由基能力,動物實驗(血清、組織)包括細胞試驗,一般都是表達出抑制羥自由基為主。如果老師測定肝組織的話,試劑二肯定是按照抑制羥自由基的來配制的!
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